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ChromaDex品牌代理商–上海金畔

1. ChromaDex品牌介绍
Chromadex 公司于1999年在加拿大成立，主要生产植物化学/中草药对照品以及标准材料，是植物参考标准的创造以及植物化学物质的产品和服务的市场领导者， ChromaDex公司提供
多达3000种产品和试剂盒，满足了自然产品的参考标准品、材料、业务的需求。现在是仍然通过严谨的科学以顾客为中心发展参考标准品和业务。
Chromadex是一个生产天然产品的创新性的公司，提供专有的、科学性的溶剂和配料，它们可用于食品强化剂、食品和饮料、化妆品和制药行业。特别是，Chromadex 公司研发和销售植
物化学和植物学的参考标准品和材料。生产和销售新颖的和天然的对人类健康有积极影响的产品。凭着公司的专业的服务和严谨的科学给市场带去安全与高品质。为了满足市场对天然产品的
标准品、材料和服务不断增长的需求，Chromadex 公司在1999年应运而生。随着各种消费类产品的出现，越来越多的消费者和政府机构要求有质量保证的研究方法，
如今Chromadex公司采取以科学严谨性为支撑的消费者为中心的方式，在参考标准品这服务性行业中处于领先地位。它在市面上的专业技术赋予它独特的基础，使它可以结合科学健康的自
然力量去开发和销售天然和新颖的配料。
2. ChromaDex重点产品
植物化学/中草药对照品
3. ChromaDex官网
http://https://chromadex.com/default.aspx
4. 金畔生物代理ChromaDex品牌联系方式

上海金畔生物科技有限公司
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Axygen品牌代理商–上海金畔

1. Axygen品牌介绍
美国Axygen公司是一家位于硅谷地区的高科技企业，主要产品为实验室耗材，包括：吸头、PCR薄壁管、PCR板、PCR封口膜、离心管、离心管架和分离柱。

2. Axygen重点产品
主要产品为实验室耗材，包括：吸头、PCR薄壁管、PCR板、PCR封口膜、离心管、离心管架和分离柱。
3. Axygen官网
http://axygen.com/

4. 金畔生物代理Axygen品牌代理商联系方式

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硫酸葡聚糖 Dextran Sulfate (DSS) － 肠炎模式动物造模试剂

溃疡性结肠炎(UC)是一种病因和发病机制尚不十分清楚的慢性肠道炎症性疾病，建立适当的结肠炎动物模型对于研究UC的病因、发病机制以及新的治疗方法具有重要意义。人们制作了多种动物模型对其进行研究，日本学者于1985年首次应用硫酸葡聚糖制备了鼠UC模型，此后，该方法广泛用于筛选治疗炎症性肠病(IBD)的新方法和临床前新药物的开发，也用于研究IBD的发病机制。其具备以下优点：
1.DSS诱导的UC模型的病理改变与人类UC最相似;
2.此模型既可以应用于UC急性期又可应用于慢性期的研究，使实验能够完整地进行;
3.制作简便、经济、易于复制。

参考方法：
方法一：
小鼠给予含50g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸钠)5000或40000的蒸馏水自由饮用7d，出现体重减轻、腹泻、血便等急性肠炎的表现.病理学切片HE染色发现小鼠病变结肠腺体结构紊乱，黏膜和黏膜下单核细胞和多核细胞浸润.DSS组病变肠段组织GSH表达较对照组明显减少(2±0.6 vs 3.14±1.0，t = 3.95, P = 0.01<0.05)，病变结肠分泌的IL-4明显升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7，t = 3.16, P = 0.009<0.01)，IFN-g轻度降低(P>0.05).
资料来源：《GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用》

方法二：
将分子量为50 00或40000的DSS溶于饮用水，配成3% DSS溶液，让BALB/C小鼠自由饮用7d，建立小鼠急性结肠炎模型;②让BALB/C小鼠自由饮用3% DSS溶液7d，然后饮用不含DSS蒸馏水14d，建立小鼠慢性结肠炎模型；模型建立成功的标志为饮用3% DSS 7 d后出现半稀便、腹泻、大便隐血(+)和肉眼血便中的任一症状。
资料来源：《葡聚糖硫酸钠致小鼠结肠炎模型的建立与评价》。

已有研究表明，不同分子量的DSS所诱导的病变特征不同，如用5000, 40,000和500,000的DSS喂养小鼠，结果典型病变只出现于5,000组和40,000组，50,000组的病变主要见于盲肠和上段结肠，此外，DSS结肠炎的严重度并不依赖于DSS摄入量，而是由DSS浓度决定，小鼠饮用的DSS量差别较小时不影响诱导出的结肠炎严重度。再次，不同种属对于不同分子量的DSS的敏感度不一。

相关试剂：
货号 英文名 中文名 分子量 其他
184005 Dextran Sulfate,Na 硫酸葡聚糖 5000 100g
184505 Dextran sulfate，Na 硫酸葡聚糖 36,000~50,000 100g
ACJ0380A Dextran sulphate sodium 硫酸葡聚糖钠 40000 100g、500g

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上海金畔生物科技有限公司提供MO-BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit Components

PowerSoil® DNA Isolation Kit For isolating genomic microbial DNA of the highest quality and purity from most environmental samples Features – Next generation method improves PCR inhibitor removal efficiency – Processes all soil types, including difficult environmental samples – Patented technology removes 100% of humic substances and PCR inhibitors – Rapid protocol enables purification of DNA from 250 mg soil in 30 minutes – Applications include biodefense, soil-borne pathogen detection, agriculture and zoology research Description The PowerSoil® DNA Isolation Kit* is our next generation soil DNA kit, which uses our novel, patented Inhibitor Removal Technology® to extract microbial DNA from all soil types and other environmental samples. The isolated DNA has the highest level of purity allowing for more successful PCR and QPCR amplification of organisms from the sample. The kit is ideal for processing all environmental samples including difficult types containing a high humic acid content such as compost, sediment, and manure. PCR analysis has been performed to detect a variety of organisms including both Gram-positive and Gram-negative bacteria (e.g. Bacillus subtilis, Bacillus anthracis), fungi (e.g. yeasts, molds), algae, and actinomycetes (e.g. Streptomyces), and nematodes. The PowerSoil® DNA Isolation Kit distinguishes itself from other kits with a patented humic substance/brown color removal procedure that removes PCR inhibitors from even the most difficult soil types, promoting successful downstream PCR analysis. When choosing between the PowerSoil® DNA Isolation Kit and the UltraClean® Soil DNA Isolation Kit, use this kit for samples that are very high in humic content. Do not let the name fool you. Our customers use this kit successfully on diverse sample types such as food (cheese, milk, meat, fruit), water, insects and fecal samples in a variety of applications including biodefense, agriculture and zoology. These soil kits are used by the USEPA, USDA, FBI and CDC for soil analysis. Sample Kit Research and Development The PowerSoil® DNA Isolation Kit is More Effective for Community Analysis by PCR    High Yield, Intact Genomic DNA MO BIO PowerSoil®Supplier A Supplier B       M   1   2   3   4   5   6   7   8   9 Total Genomic DNA was isolated from nine different sample types using the MO BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit and soil DNA isolation kits from two other suppliers. All isolations were performed following the manufacturerís protocols. Eluted genomic DNA was displayed on a 0.8% TAE agarose gel (15 µl per lane).   Confidence in Your PCR Analysis MO BIO PowerSoil®Supplier A Supplier B         M   1   2   3   4   5   6   7   8   9 PCR analysis using eubacterial primers was performed on 1 µl of the undiluted DNA eluate. PCR products were displayed on a 0.8% TAE agarose gel. Lane M is DNA Marker. Lane 1 – Landfill 0-3 inches Lane 4 – Coffee Compost Lane 7 – Mud Sediment Lane 2 – Landfill 3-6 inches Lane 5 – Marine Sediment Lane 8 – Horse Manure Lane 3 – Late-stage Compost Lane 6 – Lake Sediment Lane 9 – Mulch Topsoil Only DNA isolated with PowerSoil® yielded a PCR product for Landfill samples (lanes 1 and 2), Lake Sediment (lane 6) and Mulch Topsoil (lane 9). DNA isolated using other supplier kits failed to amplify products for these samples, most likely due to high levels of humic acid substances remaining in the final DNA eluate. Positive PCR amplification using PowerSoil® was observed with 100% of the samples. PCR analysis resulted in only 44% positive amplification with supplier kits tested. Format Silica Spin Filter Tubes Method Bead Beating Binding Capacity Up to 20 µg per filter Sample Size 250 mg Throughput 1 – 24 samples Time 30 minutes Equipment Required Vortex and Vortex Adapter Kit Components Component 12888-50 12888-100 PowerBead Tubes Solution C1 Solution C2 Solution C3 Solution C4 Solution C5 Solution C6 Spin Filters In Tubes Collection Tubes 50 1 x 3.3 ml 1 x 14 ml 1 x 11 ml 1 x 72 ml 1 x 27.5 ml 1 x 6 ml 50 200 100 1 x 6.6 ml 1 x 28 ml 1 x 22 ml 1 x 144 ml 1 x 55 ml 1 x 12 ml 100 400

上海金畔生物科技有限公司提供 T细胞分离用尼龙毛柱

在研究体内及体外的免疫系统时，分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清，所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力，从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵，而且操作简便，所需要的条件也不高，是一种非常实用的方法。

首先要指出的是实验中所使用的是分离T细胞专用的尼龙毛(Nylon Fiber)，不是化工上的尼龙纤维，曾经有人问过我这种问题，如果你买错了，可是做不出来的！

现在市面上有尼龙毛填料，也已经有了商品化的尼龙毛柱子，这两者的区别主要是以下两点：1.商品化的柱子的填料量是已经定好的，有一个确定的上样量范围。而自己买填料装柱可以控制填料量，也就是可以控制上样量，这对于样本量非常少，或是样本量非常大的实验需求非常合适。2.商品化的柱子已经经过了无菌处理(一般是辐射灭菌)，而自己装柱当然就要自己灭菌了。

操作方法：

1.秤取1.5g尼龙毛装入20-30ml玻璃容器或注射器内(要可以灭菌的)，填料的体积控制在15毫升左右(注射器上有标记，所以还是比较好控制的)，因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率，所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。

2. 加入大量的PBS平衡柱子后，用铝箔包裹，并置于适当的容器内，高压灭菌15分钟。

（商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略，经过PBS平衡后可以直接进行下列步骤。）

3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内，顶部以铝箔覆盖，避免污染。

4. 注射器下端，橡皮管，弹簧夹用无水酒精消毒。打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。

5.首先，加入3-4倍柱体的无血培养基平衡，之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡（上述培养基都要预热），最后等培养基液面接近柱填料液面时，关闭弹簧夹。

6. 样本细胞悬浮液浓度控制在约5×108cells/ml，上样量一般是1/3-1/5柱体积。样品加入之后，再加入少量培养液，然后关闭弹簧夹。

7.覆盖铝箔，垂直固定，置于消毒过的容器中，于培养箱内37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。

8. 从培养箱中拿出柱子，置于超净台内，除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管，加入适当体积经37℃预热的培养基，打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min，流出约5ml之后，流出的培养液基变得不透明，此时其中含有T细胞，收集这一部分培养基。

9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度，实际上，收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集，因为即使收集更多的量，回收率几乎不会增加。

10 .上述操作后，实验结果如下：

细胞的回收率为： 15~20 ％

T细胞含量： 85~95 ％

B细胞污染率： 1 5 ％

多数细胞被确定为T细胞。

（注）收集粘附于尼龙毛上的细胞时，将T细胞收集完毕后的尼龙毛再无菌操作的状态下取出，转移到适当的容器中，用镊子小心的将尼龙毛松开，粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射器芯插入注射器内，通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。

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电泳缓冲液
概述
电泳缓冲液是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液，用以稳定体系酸碱度。常见的核酸电泳缓冲液有：TAE、TBE、TPE和MOPS等。
作用
缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应，正极发生的是氧化反应（4OH–4e->2H2O+O2)，负极发生的是还原反应（4H++4e->2H2)，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力，使溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性，以利于DNA分子的迁移，例如，一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子，Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢；太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。
电泳缓冲液还有一个组分是EDTA，加入浓度为1-2mmol/L，目的是螯合Mg2+ 等离子，防止电泳时激活 DNA酶，此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
特点
TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。
TBE的特点是缓冲能力强，长时间电泳时可选用TBE，并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用，并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收电泳中使用。
TPE的缓冲能力也较强，但由于磷酸盐易在乙醇沉淀过程中析出，所以也不宜在回收DNA片段的电泳中使用。
配制方法
50×TAE Buffer 配制方法：
1。称量氨基丁三醇 242g，Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中；
2。向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌均匀；
3。加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；
4。用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
使用时稀释50倍 即1×TAE Buffer
10×TBE Buffer配制方法：
1。称量氨基丁三醇 108g，Na2EDTA.2H2O 7.44g，硼酸55g 于1L烧杯中；
2。加入约800ml去离子水，搅拌均匀；
3。用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
使用时稀释10倍 即1×TBE Buffer

10×TBE缓冲液
保存于运输说明：
RT
详细信息：

10×TBE缓冲液

10×TBE缓冲液

货号 规格 价格
M9031 500 ml 180

应用

核酸分子琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳。

同时作为电泳缓冲液和凝胶制备缓冲液。

用于小于1500 bp RNA和DNA电泳分离。

不宜在回收电泳中使用。

注意事项

凝胶制备和电泳使用新鲜0.5×TBE缓冲液。

0.5×TBE缓冲液配制：50 ml 50×TBE与950 ml去离子水充分混匀。

双链线性核酸分子在TBE缓冲液中的迁移速度要比TAE中慢10%。

注：电泳缓冲液一般以储存液形式配制，浓度为n10×，工作时稀释n10倍，浓度为1×，而TBE储存液存放时间过长容易出现沉淀，影响电泳结果，因此配制成10×，工作浓度为

0.5×。为保持电泳所需的离子强度和pH，应经常更换电泳缓冲液。